膝骨关节炎（KOA）是临床高发慢性退行性骨关节疾病，TLR4/MyD88/NF-κB 信号通路是介导其炎症损伤的核心通路。本研究制备马钱子碱-丝素蛋白复合微针，探究其经皮给药干预 KOA 的疗效及通路调控机制。采用溶液浇铸法制备载药微针并优化工艺，通过单碘乙酸钠构建 KOA 大鼠模型，设假手术组、模型组、阳性药物组及微针低中高剂量组，连续干预 30 天。观察大鼠行为学与膝关节肿胀变化，HE 染色观察病理形态，ELISA 检测血清炎症因子，Western-blot 检测通路蛋白表达。结果显示，该微针形貌规整、缓释性能良好，可显著缓解大鼠关节肿胀与软骨退变，降低 IL-1β、TNF-α、IL-6 水平，下调 TLR4、MyD88、NF-κB p65 蛋白表达。表明马钱子碱-丝素蛋白微针可通过抑制 TLR4/MyD88/NF-κB 通路活化，减轻关节炎症、延缓软骨退变，为 KOA 治疗提供新型经皮给药制剂与实验依据。