目的：研究血清心肌酶谱、肌钙蛋白Ⅰ（cTnⅠ）、肌红蛋白（Mb）与脑钠肽（BNP）联合检测在急性心肌梗死（急性心肌梗死）临床诊断中的应用价值。方法：选取 2024 年 1 月-2025 年 6 月本院收治的 92 例急性心肌梗死患者作为发病组，另选取同期 92 例非心肌梗死的心血管疾病患者作为对照组。对全部患者均进行血清心肌酶谱、肌钙蛋白Ⅰ、肌红蛋白与脑钠肽的联合检测，统计两组患者的检测结果。结果：发病组血清 CK 均值（1056.32±325.65）U/L、CK-MB 均值（128.65±42.38）U/L、LDH 均值（589.42±156.78）U/L、cTnⅠ均值（13.95±2.63）ng/mL、Mb 均值（386.25±98.56）ng/mL、BNP 均值（895.65±215.36）pg/mL，各项指标均显著高于对照组，P<0.05；联合检测诊断急性心肌梗死的灵敏度是 96.74%、特异度是 94.57%、准确率是 95.65%，均显著高于 cTnⅠ、Mb、心肌酶谱联合等单一指标检测，P<0.05；发病组发病不同时段（<6h、6-12h、>12h）各指标水平呈阶段性变化，cTnⅠ、Mb 在发病<6h 即显著升高，CK、CK-MB 在 6-12h 达峰值，BNP 随发病时间延长持续升高，P<0.05。结论：血清心肌酶谱、cTnⅠ、Mb 与 BNP 在急性心肌梗死患者的诊断中，可显著提升灵敏度、特异度与准确率，便于医师精准评估患者病情，制定有效治疗方案，具备临床应用价值。